Consejos de pipeta de baja unión Puede reducir significativamente los residuos de muestra debido a su diseño de la superficie interna hidrófoba, y son particularmente adecuados para manejar reactivos costosos, líquidos viscosos o muestras trazadas (como proteínas y ácidos nucleicos). Sin embargo, si no se operan correctamente, aún pueden afectar la precisión y la repetibilidad del experimento. El siguiente es un análisis de errores y soluciones comunes en uso en combinación con especificaciones operativas de laboratorio:
Malentendido 1: Ignorar el reinicio de la punta
Operación incorrecta: aspira directamente la muestra y omita el paso previo al rinis.
Impacto: aunque las puntas de pipeta de bajo unión pueden reducir los residuos, para muestras como suero, proteínas u solventes orgánicos, sus paredes internas aún pueden formar una película micro-líquido debido a la tensión superficial, lo que resulta en un bajo volumen inicial de pipeteo.
Enfoque correcto: antes de la pipeteo formal, repita la descarga de aspiración de 2 a 3 veces con la misma muestra para formar una capa de película de líquido estable en la pared interna de la punta (excepto los líquidos de alta temperatura/baja temperatura).
Malentendido 2: La velocidad de aspiración es demasiado rápida o el ángulo está inclinado
Operación incorrecta: aspira el líquido rápidamente o la pipeta se inclina más de 20 °.
Impacto:
Pipeta demasiado rápido: burbujas o succión de espalda (el líquido se apresura a la pipeta y contamina el pistón);
Pipeta inclinada: cambia la presión de la superficie del líquido, lo que resulta en un volumen de pipeteo inexacto y un mayor volumen residual. Enfoque correcto:
Pipeta lentamente y suelte lentamente: opere a una velocidad constante y controle la velocidad de liberación del pistón;
Sostenga verticalmente: mantenga el ángulo de inclinación ≤20 ° cuando la punta de la pipeta esté sumergida en la superficie líquida.
Malentendido 3: Ignorar las diferencias operativas de los líquidos viscosos
Operación incorrecta: use la misma velocidad de pipeteo que los líquidos ordinarios para muestras de alta viscosidad (como el glicerol y las suspensiones celulares).
Impacto: los líquidos viscosos fluyen lentamente en la pared interna de la punta de la pipeta, y la descarga rápida causará un aumento significativo en el volumen residual, compensando las ventajas del diseño de baja adsorción.
Enfoque correcto:
Extienda el tiempo de inmersión: manténgase en la superficie del líquido durante 1 segundo después de aspirarse antes de quitarlo, y haga una pausa durante 1 segundo antes de presionar la segunda marcha para soplar el líquido al descargar;
Elija un consejo de pipeta de boca ancha: para macromoléculas o muestras de células, use una punta de pipeta de baja adsorción de boca ancha (70% más grande que la apertura estándar) para reducir la fuerza de corte.
Concepto erróneo 4: presionar con fuerza al instalar la punta
Operación incorrecta: golpear repetidamente la manija de la pipeta para "apretar" la punta.
Efecto: el impacto a largo plazo usará los componentes de sellado de la pipeta, destruirá la atracción y el error de fuga o volumen.
Método correcto: inserte la pipeta verticalmente en la punta, presione ligeramente y gire ligeramente a la izquierda y a la derecha para adaptarse.
Concepto erróneo 5: Almacenamiento o reutilización incorrecta
Operación incorrecta:
Coloque la pipeta plana cuando haya líquido residual en la punta;
Reutilice los consejos de baja adsorción desechables para ahorrar costos. Impacto:
Poner el flujo plano del flujo de líquido para corroer el resorte del pistón;
La reutilización puede afectar la precisión debido a la contaminación cruzada o la deformación estructural. Método correcto:
Deseche la punta inmediatamente después de la pipeización, y cuelgue la pipeta verticalmente;
La reutilización está estrictamente prohibida, especialmente cuando se trata de experimentos sensibles como PCR e isótopos.
Asesoramiento profesional: maximice las ventajas de los consejos de baja retención
Haga coincidir las propiedades de los líquidos:
Líquidos volátiles (como el cloroformo): evite usar puntas ordinarias de baja retención y use puntas seguras a solventes o pipetas de pistón externos diseñadas para reactivos volátiles.
Verificación de calibración:
Pese regularmente el peso del agua pura pipetea con un balance analítico (1 ml = 0.9982 g a 20 ℃) para verificar si el volumen real cumple con el estándar.
Resumen de puntos clave: los consejos de baja retención mejoran la precisión al reducir la pérdida de muestra, pero si los detalles de la operación se ignoran, aún puede ser contraproducente. La instalación estandarizada, el control de velocidad, la adaptación a las características de la muestra y el uso estricto único son la base para lograr experimentos de alta repetibilidad.